丹毒败血症:猪红斑丹毒丝菌形态、生化特征、鉴定及药敏试验——摘要、材料与方法
摘要
目的分析乐东黎族自治县人民医院收治的2例类丹毒败血症患者的临床及微生物特征，为类丹毒诊断和治疗提供参考依据。方法回顾性分析乐东黎族自治县人民医院2023年12月—2024年1月收治的2例经血培养确诊为类丹毒败血症患者的临床特征和治疗情况，使用全自动血培养系统和固体培养基培养病原菌，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法和16s rRNA对培养出的细菌鉴定，微量肉汤稀释法检测病原菌对抗菌药物的敏感性。结果2例患者在冬季发病，均有接触猪或鱼类的外伤感染史，有高热、畏寒、胸闷、气短症状，门诊拟“发热待查”入院。实验室检查结果提示炎症指标异常增高，血和伤口分泌物标本有菌生长。血培养报阳后涂片可见革兰阳性杆菌，呈长丝状或短链排列。
将菌株接种于哥伦比亚血琼脂平板，置于35℃恒温培养箱中孵育。24 h后观察可见针尖大小的初始菌落形成，继续培养至48 h，菌落逐渐增大并呈现典型的圆形、湿润、透明且凸起形态，边沿整齐，表面呈灰白色，在菌落周围可清晰观察到狭窄的溶血环，菌落涂片革兰染色阴性，分离菌经质谱和16s rDNA测序鉴定为红斑丹毒丝菌；2个分离株对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢吡肟、美罗培南、红霉素、克拉霉素和左氧氟沙星均敏感。病例1有恶性肿瘤基础病，就诊时周围组织感染已较严重，使用阿莫西林克拉维酸钾3 d后治疗失败；病例2根据药敏结果接受氨苄西林治疗8 d后取得良好的效果。结论类丹毒临床特征不典型，易被误诊漏诊，对于从事猪或鱼类相关职业人群，外伤后有高热者，应及时采集相应标本进行病原学检测，根据药敏报告合理使用抗菌药物，改善预后。
类丹毒是由红斑丹毒丝菌（Erysipelothrix rhusiopathiae,ER）所致全球分布的急性、热性人畜共患传染病。猪最易感染ER，称为猪丹毒。ER在19世纪末被确定为人类病原体，人感染时称为类丹毒，临床上绝大多数表现为局限性皮肤感染，败血症较为罕见。我国为猪丹毒流行较严重的国家之一，也是类丹毒的散发地区，但在海南地区未见报道。本文报告了海南乐东黎族自治县人民医院收治的2例类丹毒败血症患者的临床和微生物特征，为类丹毒感染诊疗提供重要的借鉴与参考价值。
1对象与方法
1.1研究对象
乐东黎族自治县人民医院2023年12月—2024年1月收治的2例经血培养确诊为类丹毒败血症患者。
1.2病例发现与诊疗经过
病例1：女，45岁，4个月前喂猪时不慎跌倒，左上肢软组织挫伤后伤口感染，以草药外敷伤口，未见好转。现发热，畏寒，乏力，上肢皮肤溃疡、流脓渗液、发黑、有恶臭味，手掌重度肿大。门诊拟：“软组织感染”入院，临床上经验选用阿莫西林克拉维酸钾抗感染，同时维持电解质平衡等对症支持治疗3 d，但病情未有好转，上肢组织感染仍然严重，随时出现感染性休克等并发症，家属强烈要求出院，经随访，患者出院后3 d病亡。病例2：男，35岁，2年前宰猪时不慎切断手指，治疗后好转，半年前河里捕鱼不慎大腿皮肤划伤后伤口感染，治疗后好转。现高热，畏寒，乏力，头痛，气短。门诊拟：“发热待查”入院，临床上经验选用氨苄西林抗感染，同时改善循环、护胃等对症支持治疗，8 d后体温恢复正常，复查炎症指标正常，细菌培养阴性，身体恢复正常，好转出院。具体见表1。
表1 2例患者基本临床信息
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基本临床信息 Basic clinical information |
病例1 Case 1 | 病例2 Case 2 |
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性别/年龄 Gender/Age |
女/54岁 | 男/35岁 |
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职业 Occupation |
农民 | 农民 |
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发病时间 Disease time |
2023年12月10日 | 2024年1月30日 |
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主诉 Complaint |
左上肢红肿、热痛，伴发热10 d | 发热伴气短5 d |
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诱因 Predisposition |
4个月前喂猪时不慎跌倒，左上肢软组织挫伤后伤口感染 | 2年前宰猪时不慎切断手指，半年前河里捕鱼不慎大腿皮肤划伤后伤口感染 |
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临床表现 Clinical manifestation |
发热，畏寒，乏力，上肢皮肤溃疡、流脓渗液、发黑、有恶臭味，手掌重度肿大 | 气短5 d，高热，畏寒，乏力，头痛 |
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查体 Physical examination |
体温：37.5 ℃，脉搏：90次/min，呼吸：22次/min，血压：102/70 mmHg | 体温：38.8 ℃，脉搏：116次/min，呼吸：21次/min，血压：108/60 mmHg |
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辅助检查 Accessory examination |
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| WBC [(4~10)×109/L] | 8.34×109/L | 14.01×109/L↑ |
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中性粒细胞百分比 NEU [(50~70)%] |
93%↑ | 85.8%↑ |
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降钙素原 PCT [(0~0.05) ng/mL] |
0.61 ng/L↑ | 0.93 ng/mL↑ |
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前白蛋白 PA [(180~390) mg/L] |
130.4 mg/L↓ | 110.1 mg/L↓ |
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白蛋白 ALB [(40~55) g/L] |
30.5 g/L↓ | 30.6 g/L↓ |
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血沉 ESR [(0~20) mm/H] |
37 mm/H↑ | 108 mm/h↑ |
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尿素 URE [(1.7~8.3) mmol/L] |
11.34 mmol/L↑ | |
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肌酐 CRE [(44~80) μmol/L] |
117 μmol/L↑ | |
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尿酸 UA [(42~340) μmol/L] |
533.3 μmol/L↑ | |
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血糖 GLU [(3.9~6.11) mmol/L] |
9.8 mmol/L↑ | 7.96 mol/L↑ |
| CRP [(0~10) mg/L] | 105.5 mg/L↑ | |
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影像学检查 Imaging examination |
无 | 胸部CT：心影增大，心包积液 |
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细菌培养及药敏 Bacterial culture and drug susceptibility |
血培养16 h报阳：革兰阳性杆菌。伤口分泌物和血培养鉴定结果：红斑丹毒丝菌。药敏结果：青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢吡肟、美罗培南、红霉素、克拉霉素和左氧氟沙星敏感 | 血培养18 h报阳：革兰阳性杆菌。血培养鉴定结果：红斑丹毒丝菌，药敏结果：青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢吡肟、美罗培南、红霉素、克拉霉素和左氧氟沙星敏感 |
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临床诊断 Clinical diagnosis |
蜂窝组织感染、败血症 | 心内膜炎、败血症 |
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抗生素治疗 Antibiotic treatment |
阿莫西林克拉维酸，3 d | 氨苄西林，8 d |
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预后 Prognosis |
死亡 | 好转 |
1.3菌株培养鉴定及药敏
按照《全国临床检验操作规程》，无菌采集2例患者的血液标本接种梅里埃血培养瓶放置ABCT/ALERT 3D全自动血培养系统增菌培养；血标本及伤口分泌物标本涂片，然后将其接种于广州迪景血琼脂平板35℃培养24 h，根据观察菌落特征和涂片形态疑似ER，菌落进一步分离纯化，经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）和VITEK系统（法国生物梅里埃公司）鉴定和靶向DNA基因（北京知序生物科技有限公司）测序；使用微生物（链/肠球菌）药敏分析系统（丹麦Biosense公司）检测菌株对抗菌药物的敏感性，参照美国CLSI M45标准，选择纯培养的菌落配置0.5麦氏浊度菌悬液，使用CAMHB-LHB肉汤进行药敏试验，35℃空气培养20~24 h后观察结果。当质控菌株肺炎链球菌ATCC 49619在控时，记录药敏试验结果。