雪茄烟中霉菌培养基种类筛选、计数方法适用性研究（一）-上海谓载科技有限公司

雪茄烟中霉菌培养基种类筛选、计数方法适用性研究（一）

来源：烟草科技发布时间:2025-11-25 18:21:58 浏览：18 次

摘要：为明确霉菌计数方法对雪茄烟的适用性，采用孟加拉红琼脂培养基、改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基和SYMPHONY Agar快速显色培养基对13种雪茄烟进行霉菌计数，评价3种培养基在不同接种方式条件下雪茄烟中霉菌计数结果的一致性，并对各霉菌计数方法进行比较。结果表明：①同种接种方式条件下，3种培养基的霉菌计数结果的一致性较好；②相同培养基条件下，平板涂布法操作更简便，菌落分布均匀，典型菌落更易判读；③3种霉菌计数培养基相比，SYMPHONY Agar快速显色培养基培养周期短，霉菌典型菌落大小均匀，更容易计数。因此，SYMPHONY Agar快速显色培养基和平板涂布法接种方式更适合于雪茄烟中的霉菌计数。

霉变是烟草及烟草制品存储中需要重点研究解决的关键问题之一，霉变除影响烟草及烟草制品感官品质外还可能造成严重的经济损失[1,4-6]。雪茄烟与传统卷烟相比，更易发生霉变，而预防和控制雪茄烟霉变的前提是能够快速准确地检测雪茄烟中的霉菌含量，评估雪茄烟霉变发生的风险。由于雪茄烟生产及存储的特殊性和霉菌的差异性，寻找更加适合于雪茄烟中霉菌计数的方法尤为重要。

国内外食品行业出台了霉菌计数相关标准检测方法，如ISO 21527—2:2008,GB 4789.15—2016和美国FDA官方检测方法等，这些微生物学霉菌计数方法主要采用孟加拉红琼脂培养基或马铃薯葡萄糖琼脂培养基，推荐使用平板倾注法或平板涂布法两种接种方式。烟草行业也参考食品相关检测方法建立了烟草及烟草制品中霉菌计数方法标准，采用改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基进行平板倾注法接种。林华清等针对烟草及烟草制品中8种常见霉菌，对霉菌计数用培养基种类进行了筛选，但未对实际烟草样品进行适用性验证和分析。

由于不同类型烟草及烟草制品中霉菌种类较多且存在差异性，同时培养基种类和接种方式也直接影响计数结果的准确性，若在同等条件下将样品中的霉菌尽可能多地培养出来，有必要对适宜的培养基种类进行系统比较和筛选，并优化接种方式，以得到稳定准确的检测结果。为此，对目前的霉菌计数方法综合分析后，选用孟加拉红琼脂培养基（GB法推荐用培养基）,改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基（YC/T法推荐用培养基）和SYMPHONY Agar快速显色培养基（Biokar法推荐用培养基）等3种培养基，采用平板涂布法与平板倾注法两种接种方式对国内市售13种雪茄烟进行霉菌计数，研究3种培养基在不同接种方式条件下雪茄烟中霉菌计数结果的差异性及霉菌形态的变化，并对各霉菌计数方法进行适用性评价，旨在为筛选出适宜雪茄烟的霉菌计数方法提供参考。

1材料与方法

1.1样品信息

从视觉,嗅觉的角度，根据雪茄烟的霉变程度，选择国内市售13种具有代表性的雪茄烟（见表1）作为试验样品。13个样品按茄芯原料形态分类，分为烟束（8种）,烟片（4种）和烟丝（1种）三类；按制作方式分为手制（10种）,半手制（1种）和机制（2种）三类；按包装形式分为木盒（4种）,纸盒（7种）和铁盒（2种）三类。

表1 13种雪茄烟样品基本信息
Tab.1 Basic information of 13 cigar samples

样品编号	茄芯原料形态	制作方式	包装形式
A	烟束	手制	木盒
B	烟束	手制	纸盒
C	烟束	手制	纸盒
D	烟束	手制	铁盒
E	烟片	机制	纸盒
F	烟片	机制	铁盒
G	烟束	手制	木盒
H	烟片	手制	纸盒
I	烟片	手制	木盒
J	烟丝	半手制	纸盒
K	烟束	手制	纸盒
L	烟束	手制	木盒
M	烟束	手制	纸盒

1.2仪器与试剂

Bagmixer®400均质器（法国Interscience公司）；HZT-2000电子天平（福州华志科学仪器有限公司）；DZKW-4电子恒温水浴锅（北京中兴伟业仪器有限公司）；CL-40M高压灭菌锅（日本AUTOCLVAE公司）；SCAN 1200自动菌落计数器（法国Interscience公司）；VORTEX 1涡旋振荡器（德国IKA公司）；CTHI-250B2恒温恒湿箱（上海施都凯仪器设备有限公司）。

孟加拉红琼脂培养基（广东环凯微生物科技有限公司）；改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基（按照烟草行业标准制备）；SYMPHONY Agar快速显色培养基（法国Solabia集团Biokar公司）；225 mL磷酸盐缓冲液,无菌培养皿,无菌L型涂布棒,无菌均质袋（广东环凯微生物科技有限公司）。

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