银杏黑斑病和轮纹病病菌生长、产孢试验和孢子萌发试验(二)
3结果
3.1病原菌生长和产孢试验
3.1.1温度对病原菌生长和产孢的影响
从表1可看出,黑斑病菌在10℃~35℃都能生长和产孢,生长适宜范围为20℃~30℃,最适25℃;35℃产孢最多。轮纹病菌的生长温度为10℃~30℃,不能够耐35℃的高温,适宜范围为20℃~25℃,最适25℃;该菌在10℃条件下不能产孢,20℃和25℃时产孢量大,两处理间不存在显著性差异,两者与其余处理相比均达到显著水平。
3.1.2湿度对病原菌生长和产孢的影响
表2不同湿度对黑斑病菌和轮纹病菌生长和产孢的影响
从表2可看出,2种菌在相对湿度65%以上都能很好地生长。黑斑病菌在RH为75%和85%时,生长速度和产孢量都没有显著性差异,此时生长速度最快,RH98%时产孢最多。轮纹病菌在RH75%生长最快,RH98%产孢量最大,在RH75%~85%范围内,产孢量没有达到显著水平。
3.1.3培养基对病原菌生长和产孢的影响
表3不同培养基对黑斑病菌和轮纹病菌生长和产孢的影响
由表3可知,2种菌在PDA培养基上比在WA、GLA上生长快,且产孢量大,特别是轮纹病菌,在PDA培养基上的产孢量是WA、GLA上的44~70倍。2种菌在WA培养基上生长得很稀疏,产孢量??;在PDA上,菌丝浓密,轮纹病菌还形成内缘菌丝稀疏、外缘菌丝浓密的同心环型菌落;在GLA上的菌落较PDA上的稀疏,轮纹病菌也不形成同心环型菌落。
3.1.4酸碱度对病原菌生长和产孢的影响
试验结果(表4)表明,2种菌在pH值<2都不能生长,生长和产孢pH值范围为4~11,并且以pH值5~11基质中生长为好。黑斑病菌在pH值为11的基质中生长快,但此时菌落稀疏,产孢量较少;pH值为7时,该菌生长速度仅次于pH值11,且菌丝浓密,产孢量最大;在pH值4~5和pH值9~11范围内的产孢量没有达到极显著水平。轮纹病菌在pH值4~9基质中形成同心环型菌落,其中以pH值为5的基质上生长最好,气生菌丝发达,菌落浓密,pH值为4和pH值为9的产孢量最大,两处理间的产孢量没有显著性差异。
3.1.5光照对病原菌生长和产孢的影响
从表5可知,光照对黑斑病菌的生长、产孢,以及对轮纹病菌的生长都没有显著的影响。对于轮纹病菌,日光灯照射4d后开始形成分生孢子,自然光照射6d后形成少许分生孢子,全黑暗条件下8d开始形成分生孢子。由此可见,光照能促进轮纹病菌分生孢子的形成,且日光灯照射比自然光照射,产孢量多1倍以上。
3.2孢子萌发试验
3.2.1温度对分生孢子萌发的影响
从表6可看出,2种菌的分生孢子萌发温度是10℃~35℃。黑斑病菌孢子萌发适温为20℃~35℃,此范围内,该菌分生孢子24h时的萌发率未达α?.??显著水平。轮纹病菌的分生孢子萌发适宜温度为15℃~30℃,最适为20℃。另外,在10℃的培养条件下,2种病原菌的分生孢子培养8h都没有开始萌发,在15℃~35℃范围内,8h的萌发率最低为6.37%,最高达86.98%。
3.2.2湿度对分生孢子萌发的影响
从表7可看出,2种菌的孢子在RH100%+水滴、RH100%条件下萌发较好,最适的是RH100%+水滴的萌发条件。黑斑病菌的分生孢子在泡水、RH90%的条件下培养8h都没有开始萌发,轮纹病菌的孢子在泡水处理中8h的发芽率为0,24h的萌发率为5.8%,而在RH90%条件下,培养24h都没有萌发。
3.2.3酸碱度对分生孢子萌发的影响
从表8可看出,2种菌的分生孢子在pH值2~11都能萌发。黑斑病菌的分生孢子萌发适宜pH值为2~7,最适pH值为4~5;轮纹病菌的孢子在pH值2~5范围萌发较好,最适为pH值4。由此可见,偏酸性的环境有利于黑斑病菌和轮纹病菌的分生孢子萌发,尤其是后者。
3.2.4培养液对分生孢子萌发的影响
从表9可看出,黑斑病菌的分生孢子24h的发芽率在α?.??水平上没有显著性差异,说明该菌分生孢子萌发与培养液有无养分没有显著关系。而轮纹病菌的分生孢子在银杏叶汁稀液和1%葡萄糖液中的萌发率高,且不存在显著性差异;但与在无菌水中萌发比较就存在显著性差异。
4讨论
朱克恭研究认为银杏叶枯病的病原菌中,黑斑病菌在6月~10月都有大量的出现,而轮纹病在高温季节很少出现,仅在10月份才有所增加。本实验得到相似的结果,轮纹病菌不能耐35℃的高温,黑斑病菌耐高温的能力强。2种菌在RH65%以上都生长好,适宜的相对湿度为75%~85%,试验结果表明:相对湿度大有利于分生孢子形成;饱和湿度且有水滴的培养条件,分生孢子的发芽率最高。因此,在综合防治中,清除银杏果园内的杂草,降低地表面的相对湿度,可以在一定程度上减少侵染来源。泡水处理中,分生孢子的发芽率低,也许与缺氧有关。
总的来说,黑斑病菌生长、发育和产孢的温度范围都比轮纹病菌的广,黑斑病菌的产孢对光照反应不敏感,其分生孢子萌发对营养的要求也不高,对寄主植物有更大的威胁性。朱克恭在对银杏叶枯病的研究中,认为黑斑病菌占病原菌的主要地位,其不仅能以菌丝体在芽、落叶组织内越冬,还能以分生孢子在落叶内越冬,且长期存活,以至于黑斑病菌能够成为病叶组织内的主要病原菌。这些说明黑斑病菌对外界环境有较强的适应性,对银杏叶的危害起主要作用。
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